尿素溶液、饱和食盐水诊断哺乳仔猪球虫病效果比较
03-25 10:42
广东养猪业
尿素溶液、饱和食盐水诊断哺乳仔猪球虫病效果比较
吴家斌,金丽珠,刘立恒
(江西农业大学动物科技学院,江西 南昌 330045;)
1.材料与方法
1.1 粪便来源 7~20日龄哺乳仔猪新鲜粪便60份,由江西高安某3个猪场(Z1、Z2、Z3、)各提供20份(份/窝)。
1.2 药品 尿素CO(NH2)2九江石油化工厂生产;食盐NaCl江西盐业有限公司生产。
1.3漂浮液的配制 饱和食盐水(溶液27. 45%, 比重1.18)、尿素溶液(溶液48.57% , 比重1.13。),分别按每1000 mL清水中相应加380、944.4g、加热溶解、冷却、过滤即可。
1.4卵囊的检测 栏内多点采集哺乳仔猪新鲜粪便3~5g/窝。将粪便2~3g放于250 mL烧杯中,滴加少许清水搅拌成糊状, 续加清水100 mL搅拌、260目绢筛过滤,分装于两只50 mL的离心管中,2000r/min离心5 min倾上清液留沉淀物,分别加入饱和食盐水和尿素溶液各40 mL,拌匀后分别移入2只标记的35 mL白小口瓶中,瓶口液体成凸面。静置20 min,用载玻片触及凸面迅速翻转,在16×10倍显微镜下寻找卵囊。
1.5感染标准的设定 显微镜下没有球虫卵囊的为阴性“-”;随意改变3个视野,当0<平均卵囊数≤1为阳性“+”;当1<平均卵囊数≤3为“2+”;当3<平均卵囊数≤8为“3+”;当8<平均卵囊数≤15为“4+”;当平均卵囊数>15个为“5+”。
2.结果
2.1漂浮卵囊现象 检测卵囊过程中,尿素溶液瓶内,随静置时间延长,杂质渐下降于瓶底,形成瓶口清亮瓶底浑浊;饱和食盐水瓶内,随静置时间延长,瓶内絮状物及气泡渐明显并上浮至瓶口,形成瓶口浑浊瓶底清亮(详见图1、图2)。
2.2显微镜下现象 含尿素溶液的较清亮,杂质和气泡较少,卵囊清晰且数量相对多; 含饱和食盐水的较浑浊,杂质和气泡较多,卵囊不清晰且数量相对少。(详见图3、图4、图5、图6)。
2.3 Z1、Z2、Z3猪场哺乳仔猪球虫病的诊断情况 等分哺乳仔猪粪样,用饱和食盐水、尿素溶液两漂浮液对应检查60份粪样中的球虫卵囊。Z1、Z2、Z3猪场哺乳仔猪球虫病阳性率分别为60﹪(12/20)、55﹪(11/20)、45﹪(9/20)和80﹪(16/20)、70﹪(14/20)、65﹪(13/20),饱和食盐水比尿素溶液检测球虫病不仅阳性率低而且感染强度也低。尿素溶液诊断哺乳仔猪球虫病效果更好(详见表1)。
4.分析与讨论
4.1检测粪便中的球虫卵囊,粪便量及成分、漂浮液种类及浓度,是影响诊断球虫病的主要因素。哺乳仔猪处于哺乳、发病特殊期时,蛋白质、脂肪及细小颗粒多,容易遮掩卵囊,直接影响检测效果;当取较大粪便量漂浮检测时,所含卵囊固然增多,但杂质含量相应增多,影响检测效果;选择漂浮液及其浓度(比重大小)也直接影响检测效果。
4.2等分哺乳仔猪粪样,用饱和食盐水、尿素溶液两漂浮液对应检查60份粪样中的球虫卵囊。结果表明:尿素溶液诊断哺乳仔猪球虫病优于饱和食盐水。其原因是哺乳仔猪粪便中存在的蛋白质较多,饱和尿素溶液使蛋白质变性,蛋白质构象改变而沉淀;饱和食盐水与蛋白质产生盐析现象,析出的蛋白质在饱和食盐水中带动其它细小颗粒渐浮。粪便中的油脂比重小,依靠离心倾上液而除去油脂。
4.3 用直接涂片法检测哺乳仔猪球虫卵囊,其特点是检测快速 、准确性差;用饱和食盐水漂浮法检测哺乳仔猪球虫卵囊,其特点是视野杂质较多、检测结果相对准确但有一定误差;离心法(Teienan)检测时,其特点是视野很清晰,检测结果准确但检测方法复杂、成本太高、不适宜基层兽医工作者;尿素溶液漂浮法检测哺乳仔猪球虫卵囊,视野清晰,检测结果准确,成本低且尿素溶液经过处理后可作为肥料再利用,是哺乳仔猪球虫病诊断的好方法,建议推广使用。
2.3 Z1、Z2、Z3猪场哺乳仔猪球虫病的诊断情况 等分哺乳仔猪粪样,用饱和食盐水、尿素溶液两漂浮液对应检查60份粪样中的球虫卵囊。Z1、Z2、Z3猪场哺乳仔猪球虫病阳性率分别为60﹪(12/20)、55﹪(11/20)、45﹪(9/20)和80﹪(16/20)、70﹪(14/20)、65﹪(13/20),饱和食盐水比尿素溶液检测球虫病不仅阳性率低而且感染强度也低。尿素溶液诊断哺乳仔猪球虫病效果更好(详见表1)。
4.分析与讨论
4.1检测粪便中的球虫卵囊,粪便量及成分、漂浮液种类及浓度,是影响诊断球虫病的主要因素。哺乳仔猪处于哺乳、发病特殊期时,蛋白质、脂肪及细小颗粒多,容易遮掩卵囊,直接影响检测效果;当取较大粪便量漂浮检测时,所含卵囊固然增多,但杂质含量相应增多,影响检测效果;选择漂浮液及其浓度(比重大小)也直接影响检测效果。
4.2等分哺乳仔猪粪样,用饱和食盐水、尿素溶液两漂浮液对应检查60份粪样中的球虫卵囊。结果表明:尿素溶液诊断哺乳仔猪球虫病优于饱和食盐水。其原因是哺乳仔猪粪便中存在的蛋白质较多,饱和尿素溶液使蛋白质变性,蛋白质构象改变而沉淀;饱和食盐水与蛋白质产生盐析现象,析出的蛋白质在饱和食盐水中带动其它细小颗粒渐浮。粪便中的油脂比重小,依靠离心倾上液而除去油脂。
4.3 用直接涂片法检测哺乳仔猪球虫卵囊,其特点是检测快速 、准确性差;用饱和食盐水漂浮法检测哺乳仔猪球虫卵囊,其特点是视野杂质较多、检测结果相对准确但有一定误差;离心法(Teienan)检测时,其特点是视野很清晰,检测结果准确但检测方法复杂、成本太高、不适宜基层兽医工作者;尿素溶液漂浮法检测哺乳仔猪球虫卵囊,视野清晰,检测结果准确,成本低且尿素溶液经过处理后可作为肥料再利用,是哺乳仔猪球虫病诊断的好方法,建议推广使用。