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向华:阻断非洲猪瘟病毒入侵的九个措施

2021-10-13 08:56 《猪业》

​阻断非洲猪瘟病毒入侵的九个措施

向华 广东省农业科学院动物卫生研究所

摘要

在非洲猪瘟防控常态化的情况下,猪场需要有简便高效的生物安全解决方案,本文从生猪养殖用水处理、布网式消毒、食材处理、洗手消毒、人员通道消毒、淋浴消毒、工作服工作靴处理、水帘循环水处理、检测实验室防止核酸污染等9个方面提出了相应的解决办法与措施。希望有助于生猪产业的顺利复产。

关键词

非洲猪瘟;生物安全;复产;次亚酸水;消毒

2018年8月非洲猪瘟传入我国,养猪业受到了重大的打击,到目前为止已经3年多了,我国生猪产业经历了建国以来前所未有的巨大的动荡。对烈性传染病和外来病采取封锁、捕杀的政策不再有效,精准清除技术,核酸检测技术推广应用,铁桶式养猪、楼房养猪模式迅速在全国应用,现在回头看看,发现这些措施和技术并没有根本解决防控非洲猪瘟的问题,其本质是在高猪价的前提下,维持着养猪人的积极性,猪价跌到成本线以下,问题和矛盾又纷纷呈现。现在我国生猪成本与非洲猪瘟发生之前相比明显提升,且不同企业差距巨大。比如2021年上半年牧原为7元/斤,温氏为14元/斤,其它中小企业基本在9-12元不等,与非洲猪瘟之前6元左右相比,显著提高。而市场价格在7-8元,多数养猪企业亏损严重,这是不可持续的,生猪产业仍然会有巨大的动荡。所以面对这种情况,养猪业复产、扩产还是要以降本增效为原则。因为生物安全措施,成本已经提上来了,包括人员工资奖金、必要的消毒、防护设施、用品等都是成本。所以复产、扩产主要围绕着成本增加的这部分来展开。本课题组在生物安全方面开展了一些研究,形成了一套系统性方案,希望通过这些方案的应用,在解决生物安全的同时,还能降低生产成本,提高养殖效率。

1、生猪养殖用水处理
文献表明,非洲猪瘟病毒通过污染水传播的效率是通过饲料的1万倍,雨水多时,周边环境如果被污染,非洲猪瘟传播就非常快速。猪场用水量大,所以猪场水处理十分重要。目前很多猪场采用过滤方式处理水,虽然有一定效果,但成本高,非洲猪瘟病毒粒子直径200nm左右,滤膜孔径太小,容易堵塞,需经常更换,孔径太大,病毒又可以通过。学病毒学的都明白,实验室处理病毒样本用0.22um(220nm)滤器来除掉细菌,让病毒滤过,非常容易堵塞。所以水质好的猪场,采过滤方法还可以,水质差的,难度会非常大。
所以建议采用添加消毒药的方法,高效且廉价。与城市自来水用漂白粉消毒类似,用电解次亚酸水(主要成分为次氯酸钠和亚氯酸钠)进行消毒效果非常明显,且成本低廉。次亚酸水为一种氯制剂,除能杀死病毒以外,还可高效降解非洲猪瘟病毒粒子中的基因组核酸(表1)。
1不同有效氯浓度次亚酸水对ASFV病毒核酸的降解效果(qPCR Ct值)

注:“-”表示qPCR未检测到核酸。

病毒稀释10-10000倍,有效氯浓度从5、10、20….100ppm时,与病毒反应,qPCR检测结果:病毒10倍稀释时,与PBS对照比较无明显变化,无消毒效果;病毒100倍稀释时,40ppm及以上有效氯可完全降核酸;病毒1000倍稀释时,5ppm及以上有效氯可完全降核酸,杀灭病毒。稀释病毒主要是稀释有机质,排除干扰。所以对于水消毒,尤其是养殖场饮用深井水的消毒,由于有机质含量低或无,5ppm的有效氯浓度即可完全降解水中污染病毒的核酸,也即意味着杀灭病毒;但如果是池塘水,有机质含量不明确时,需要测试不同浓度有效氯加入后,只要剩余有效氯保持在5ppm,即可推算有效氯的使用浓度。总之,结合实地情况,配合检测结果,合理消毒,避免过度消毒或消毒不够。同时课题组对伪狂犬病毒、猪瘟病毒、塞尼卡病毒、水疱性口炎病毒进行了试验,结果完全相似。

因此,水消毒方式只需在入水口或出水口用加药器按比例加入次亚酸水即可,不需要维护,定期检查即可。次亚酸水可以用全自动电解消毒水机用食盐电解的方法自行制备,操作简单,成本低廉,可检测(用试纸条几秒钟可检测有效氯含量)。商品化的次氯酸钠也可以,只是纯度不高,刺激性味比较大。
2、布网式消毒
顾名思义,布网式消毒就是在猪场出入口、人猪走道、圈舍门口、猪圈、出猪台等可以传播疾病地方布下消毒管道,甚至猪场外道路,每天定点、定量进行喷雾消毒,对环境、空气、圈舍、地表、猪体表等布下天罗地网,阻断各种病原的传播机会。采用这种方式,最大的疑问是消毒成本、对环境污染和湿度的问题。与前述水消毒一样,采用全自动电解水消毒水机自制消毒水,消毒水制造成本只有1.6元/吨,程序化控制,自动生产,自动消毒,省去人工操作。次亚酸水消完毒后,转变为氯化钠,不影响粪污发酵,对环境和人畜无害。湿度只在使用时的几分钟明显增加,通风几分钟后恢复正常;担心多发皮肤病,恰恰相反,发生皮肤病时,比如圆环病毒引起的皮疹,反而很快康复。
图1 定位栏布网式消毒场景
例1:鹤山一200头母猪自繁自养复养场,典型广东开放式猪场,2019年初从后备猪开始,到配种、怀孕、产仔、断奶、育肥,全程使用,无细菌性、病毒性、真菌性、霉菌性疫病发生。每天喷雾3次,3-5分钟/次。使用过程中,未发现副反应,猪只皮光毛亮,非常健康。40日龄断奶猪平均体重达30斤,超过正常水平6-10斤,正常饲养到230斤出栏,至少可缩短3-4周饲养周期,经济效益十分可观。到目前已正常出栏肥猪5批。
例2:本实验室用这种方法在普通动物舍饲养普通实验用猪,全程不使用疫苗和兽药,饲养到18月龄,未出现任何问题。猪血清抗体检测非洲猪瘟、猪瘟、蓝耳、圆环、伪狂犬gE/gB抗体,全部阴性。
布网式消毒只是个概念,不同猪场可灵活运用和借鉴选用,目的是达到病原不进场、进场不落地、落地不感染猪、感染不传播的目标,通过这种方式构建一种另类“铁桶阵”,从而达到生物安全目的。现代化养殖场考虑湿度、增加了粪水,不太适用,中小养殖场反而适用性强。
3、食材处理
猪场的蔬菜、水果、肉蛋等食材是重要的传播因子,主要是表面携带。很多猪场用市售消毒药进行消毒,或用臭氧水消毒。市售消毒药除了有效成分外,还有稳定剂、显色剂等成分对人危害不明;臭氧水发生器体积巨大,臭氧刺激性味比较大。本方案采用一种简单便携的除菌消毒净化机,只有4公斤,功率60W左右,由主机和电解模块组成(图2)。
图2 养殖场食材专用除菌消毒净化机
使用时,只需往桶里加上50升水和10克食盐,食材浸入水中,通电10-20分钟即可。用过的水可反复使用,使用次数越多,消毒能力越强。检测了对各种病毒和细菌的杀灭作用,效果极显著,且还能降解病毒的核酸。同时还可以去除果蔬中的农残,家庭也可以使用。是处理食材的一大利器。
4、洗手消毒
养殖场门口或猪舍出入口往往设置有消毒盆,在对现场消毒盆的消毒水检测过程中发现,猪场使用过硫酸氢钾复合物粉比较普遍,但检测了11种品牌的该类产品,发现只有一种含品牌含有效氯成分,其它10种不知是何成分。因此为了保证消毒效果,建议使用自制次亚酸水进行消毒,有效氯含量可以随时测定。用全自动电解水消毒水机或养殖场食材专用除菌消毒净化机自行制备,取消消毒盆方式,用水笼头或感应水笼头代替,因为消毒水在见光和接触空气时会逐渐失效。
5、人员通道消毒
通过现场试验发现,现有的人员通道喷雾消毒,多数没有发挥作用。一是进入了一个误区,认为雾化越好,消毒效果越好,现场检测结果恰恰相反;二是使用的过硫酸氢钾复合物粉不含有效氯。改用可以现场检测效果且对人无害的次亚酸水,用大粒径喷雾30秒即可。

图2 人员通道喷雾消毒效果检测
局部消毒效果看得见-摆放的检测试纸条5秒即变色,局部有效氯含量在200ppm以上,滤纸片大肠杆菌和沙门氏细菌培养鉴定杀菌效果,完全杀灭。
6、淋浴消毒
目前猪场要求人员入场淋浴必需有足够的时间才能出来,但管理和执行难度大。如前文所述,在无有机质干扰的条件下,5ppm的有效氯即可以完全降解各种病毒基因组核酸,如非洲猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪瘟病毒、塞尼卡病毒、水疱性口炎病毒等,所以对于淋浴可以根据这个原理加以提升,配套使用次亚酸水发生器,使淋浴水有效氯含量在5ppm左右,即可以达到淋浴消毒且对人无害的目的。且加热后有效氯比室温条件下还有所升高(表2)。建议用无油洗发水和沐浴露,冲洗2-3分钟即可。
表2 加热对次亚酸水有效氯的影响
温度℃
有效氯ppm
室温
101
42
108
60
113
7、工作服、工作靴处理
养殖场工作服、工作靴使用量大,其处理起来也是比较麻烦。其处理采用与处理食材方法相同,只是体积扩大而已,很容易达到消毒目的。强调一下的是食盐电解产生的次亚酸水,消毒后又转变成盐,电解后又变成次亚酸水,可以不断循环使用,不用担心消毒水剂量不够的问题。
8、水帘循环水处理
水帘降温用水容易被忽略,这是一个病原收集箱、培养箱,是病菌繁衍的温床。一般养殖场采用定期换水方式处理。本方案建采用置入电解模块,加入适当的盐,这样水帘就从单独的空气降温功能升级为空气降温+空气消毒功能,进一步提升生物安全水平。
9、检测实验室防止核酸污染

非洲猪瘟发生之后,核酸检测实验室成了中大规模场的标配,但病料、血清、PCR产物的污染很容易导致假阳性。所以检测实验室的核酸污染成了一个大问题。我们在对次亚酸水的研究过程中,发现其降解核酸的能力非常强,无论是病毒粒子中的核酸,还是质粒DNA核酸都可以迅速降解。这为防止实验室核酸污染提供了一种简便的处理方式。建议实验室每天拖地、擦拭实验台面、桌面、设备等,以及废弃物处理,全部用次亚酸水,很容易达到目的。

总之,以上9个环节的处理方案是建立在自行生产次亚酸水的条件下进行的,质量可以自我控制,尽量做到自动化,避免了假/伪消毒药的影响,其最终目的是将病毒阻挡在猪场之外。降低成本主要体现在给猪只提供了一个安全健康的环境,减少疫苗和兽药的使用,减少了人工的使用和参与,提前数周出栏是可以实现的。但是还有其他许多传染环节,一旦病毒传入,就无能为力了,所以猪场管理仍然是非常重要的。

基金项目:广东省重点领域研发计划(2020B0202080004,2019B020211003,2019B020217002),广东省现代农业产业技术体系生猪创新团队项目(2020KJ126),2020年广东省乡村振兴战略专项-生猪复养技术研究与示范推广。

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