为了帮助猪场、企业有效开展非洲猪瘟检测工作，6月16日下午，第四十七届养猪产业博览会（广州）特别举办“非洲猪瘟检测论坛”。其中，广州双螺旋基因技术有限公司研发项目经理谢会带来《恒温PCR技术在非洲猪瘟检测中的应用》。

广州双螺旋基因技术有限公司研发项目经理谢会

谢会主要介绍了常用实验室检测技术和恒温PCR在非洲猪瘟检测中的应用。她介绍，常用实验室检测技术包括普通PCR、荧光定量PCR、恒温PCR在内的分子生物学检测技术，以及包括ELISA、试纸条在内的免疫学检测技术。其中，分子生物学检测技术特异性强、灵敏度高，操作简单，产品开发容易；而免疫学检测技术特异性强、简单快速，但产品开发难度大。

她表示，普通PCR方法就像是分子检测中的胶卷相机，是将样品核酸模板与PCR试剂混合并反应后，将扩增产物取出进行凝胶电泳实验，通过凝胶成像分析条带大小来判断样品中是否含有靶标基因。荧光定量PCR方法就像分子检测中的单反相机，是使用实时PCR扩增装置实时监测PCR扩增产物并进行分析的方法。而恒温PCR方法就像分子检测中的卡片机。其应用环介导的等温扩增技术，针对靶基因6个区域设计的两对特殊设计的引物和具有链置换活性的DNA聚合酶，在等温条件下进行扩增反应。它的反应特点有：1、恒温检测——只需要一个恒定温度完成扩增反应；2、快速高效——没有反复变性退火，反应在30~60分钟内完成，扩增10⁹~10¹⁰倍靶序列拷贝；3、特异性高，由4条引物靶向6个区域；4、闭管检测，可防止由扩增产物产生的污染。

常见检测方法性能比较如下：

今年以来，农业农村部陆续放开了屠宰场和猪场的非洲猪瘟检测，而检测离不开技术支撑。基层单位需要的病原快速检测方法，要求操作简单、经济实惠、时间快速、相对准确。双螺旋公司为客户提供了Dhelix Q5动物疫病快速检测系统。该系统是一套专业应用于检测病原的分子检测系统。集成恒温PCR、实时荧光检测、智能数据判读及云实时数据同步管理等前沿科技，务求以最快速度、最精准度，将样品中存在的极微量的特定DNA，扩大转化成设备可读的荧光信号，通过以大量实际样本检测结果为支撑的数据库分析判读，最后将结果以直观的形式呈现在用户眼前。谢会表示，Dhelix Q5动物疫病快速检测套装是一个能够快速、专业、准确地解决非洲猪瘟现场检测问题的移动PCR检测实验室，对场地要求低。

（养猪信息网王诗虹整理）

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